Como intérprete, ha publicado siete álbumes de estudio: Music is Better Than Words, Holiday for Swing, No One Ever Tells You, In Full Swing, Once in a While, Great Songs from Stage & Screen, y el más reciente, Blue Skies, que grabó en los históricos estudios Abbey Road. Además de seis nominaciones a los Grammy, estos álbumes, alabados por la crítica, le han valido a MacFarlane varios números 1 en las listas de iTunes Jazz Charts y ocupan los primeros puestos en las páginas New Release Jazz. MacFarlane también ha prestado su voz de barítono actuando con Barbra Streisand y el legendario compositor John Williams en Hollywood Bowl. Con un profundo aprecio por los estándares y el Gran Cancionero Americano, MacFarlane compró toda la biblioteca de canciones de Sinatra y ha viajado por el mundo cantando con numerosas orquestas sinfónicas célebres, como los Proms de la BBC; la Orquesta Sinfónica Nacional; las orquestas filarmónicas de Los Ángeles y Nueva York; y las orquestas sinfónicas de Boston, San Francisco, Atlanta, Chicago y Baltimore, entre otras.

A los 24 años, MacFarlane se convirtió en el director más joven de la historia de la televisión cuando su serie animada Padre de familia emitida en Fox. También es cocreador, productor ejecutivo y actor de doblaje de la serie favorita de los fans ¡American Dad! A través de su productora Fuzzy Door, MacFarlane creó y protagoniza la serie de aventuras espaciales de Hulu nominada al Emmy y de acción real The Orvilleque estrenó su tercera temporada en jun 2.

En cuanto a los largometrajes, escribió y dirigió Ted, Ted 2y Un millón de maneras de morir en el Oesteque han recaudado en conjunto más de 800 millones de dólares en la taquilla mundial. MacFarlane ha producido recientemente la película de Hulu Libros de sangre y está desarrollando una versión moderna reimaginada de La venganza de los nerds con los Lucas Bros. para 20th Century Studios.

MacFarlane y Fuzzy Door tienen actualmente un acuerdo televisivo de varios años con Universal Studio Group. En virtud del pacto, se encuentra en fase de preproducción de la serie de Peacock Ted de Peacock, de la que es guionista, productor y director, y en la que vuelve a poner la voz del emblemático oso de peluche malhablado en todos los episodios. También es productor ejecutivo de la serie científica de Peacock El fin es Nyepresentada por el famoso educador científico Bill Nye, ganador de un Emmy; Los vientos de la guerrauna serie sin título de Little Rock Nine; la serie All Our Wrong Todays adaptación televisivay el cortometraje de ciencia ficción distópica de Peacock cortometraje de ciencia ficción distópica Skywatch; y la versión animada de Netflix de la película de Norman Lear Good Times. Anteriormente, fue productor ejecutivo de la serie 13 veces nominada al Emmy Cosmos: Una odisea en el espacio-tiempo y la reciente entrega Cosmos: Mundos posibles.

Como actor, MacFarlane apareció en la película de Showtime nominada al Globo de Oro La voz más fuertey en el musical familiar animado de Illumination Sing, y de Steven Soderbergh Logan Lucky. MacFarlane, que es un polifacético hasta la médula, también fue el anfitrión de la 85ª edición de los Premios de la Academia, en la que fue nominado a la "Mejor Canción Original" por Ted - y Saturday Night Live.